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              細胞計數儀的操作流程,你了解多少?
              點擊次數:279 發布時間:2021-09-24
                 細胞計數是細胞培養研究中的一項基本研究,它是了解培養細胞生長狀態,測定培養基、血清和藥物等物質生物作用的重要手段。細胞計數儀能夠在1min以內對培養的細胞分析,并獲得細胞活細胞和死細胞濃度、細胞平均體積大小、生存能力、細胞大小或體積分布曲線圖。細胞計數器還有用于藻類,微生物等直徑細胞計數器范圍內的生物。相對血球計數板法,細胞計數儀計數更加精確,快速便捷,誤差更小。
                細胞計數儀的操作流程
                1、用上述胰蛋白酶/EDTA使貼壁和半貼壁細胞懸浮,并將其重懸于至少相當于胰蛋白酶體積的一定體積的新鮮培養基中。對于成團生長的細胞,離心后在小體積中重懸,輕輕移液以吸碎成團。
                2、在無菌條件下,移取100-200μL細胞懸液。
                3、加入等體積的臺盼藍(稀釋倍數=2),輕輕移液混勻。
                4、清潔血細胞計數器。
                5、用水或哈氣濕潤蓋玻片。輕壓蓋玻片,使其在腔室內來回滑動,直到出現牛頓折射環(牛頓折射環在蓋玻片下視為彩虹狀環)。
                6、用細胞懸液(約5-10μl)填充腔室兩側,用x20放大倍數在倒置相差顯微鏡下進行觀察。
                7、計數活細胞(亮細胞)和非活細胞(染成藍色)的數量。理想情況下應計數>100個細胞,以提高細胞計數的準確性。請注意獲得>100細胞計數的方格數。
                8、使用下面的公式計算活細胞和非活細胞的濃度以及活細胞的百分比。

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